分析毛細管電泳儀的進樣操作事項

更新時(shí)間:2021-08-26 &nb坐店sp;    點擊線又次數:1276
   毛細管電泳儀是以毛細管為(wèi)分離通(tōng)道,以高壓直流電場為(wèi資山)驅動力,利用荷電粒子(zǐ)之間的淌度差異和分配系數差異鐘短進行分離,是分析科(kē)學繼液相色譜儀之後的又一重大(dà)進展,使分析上年科(kē)學從微升級進入到了納升級水平,不(b湖要ù)僅使單細胞乃至單分子(zǐ)分析成為(wèi)可能,也使蛋白質和核酸訊光等生物大(dà)分子(zǐ)分析有了新的轉機。
  毛細管電泳儀分析對進樣技術要求很高,進樣操作事項如(rú)美什下。
  一、進樣區帶越小(xiǎo)越好(hǎo):但報
  無論采用何種進樣方式,毛細管插入樣品溶液的深度一般要少于毛細管去票總長(cháng)度,以盡量減少樣品溶液經毛細吸附讀頻進入毛細管而影響進樣量的性。
  二、進樣時(shí)間以短(duǎn)為(wèi要這)宜:
  通(tōng)常進樣時(shí)間,此時(shí)毛細管粘附的樣品量相姐她對于吸入的體積可忽略不(bù)計。
  雖然毛細管電泳的進樣時(shí)間可,但由于毛細管插入樣品管照廠時(shí)不(bù)可避免地會(huì)粘附一些溶液,進樣時(shí)間喝人過短(duǎn)會(huì)影響分析的重複性。
  三、樣品預濃縮:
  受毛細管内總體積的制約,對于濃度很稀的樣品,毛細管電泳不(bù)能象又就HPLC那樣可加大(dà)進樣量來提高檢測靈敏度,但可采取一些措施來改善。吃間
  1、當樣品緩沖液的電導明顯低(dī)于電泳緩沖液時(shí),毛細管兩內腦端加上電壓後可在樣品區帶前後形成一個更大(d去服à)的電場,使樣品溶液中的分子(zǐ)遷移的更快。當這些分子(z山藍ǐ)到達電泳緩沖液邊界時(shí),由于電場減弱,遷移速度減子國慢,使樣品區帶由寬變窄,濃度提高,而達到濃縮的目的。
  2、當樣品緩沖液和電極緩沖液的電導一海筆樣,而樣品濃度較稀,不(bù)适合再作稀釋時(shí),可在進樣前先吸入一些校資水,也能達到濃縮的目的。
  無論采取何種進樣方式,上述方法都可使樣品堆積濃縮。但由于在堆積區帶電勢司公陡降,會(huì)導緻此區帶溫度升高。
  四、毛細管插入樣品溶液後,應立即開(kāi麗都)始進樣操作,完成後迅速移至緩沖液中開(kāi)始電泳。否則會(huì藍學)産生毛細作用和虹吸現象,引起誤差并使譜帶展寬。輛木
  五、電極不(bù)要和毛細管接觸,樣品貯器(qì)和緩沖液貯器我了(qì)液面的高度應保持平衡。
  六、使系統盡可能保持恒溫。因溫度直接影響粘度,而影響進樣量的恒定務明。
  七、樣品溶液中的溶劑必須與緩沖液互溶,前者的年人離子(zǐ)強度應低(dī)于後者。
  八、防止樣品溶液和緩沖液蒸發、損耗。
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